| Indicação Identificação de mutação germinativa no gene APC em caso índice (paciente com câncer colorretal) Identificação do status de portador em indivíduos com risco elevado de deenvolver a doença, por terem familiares afetados pela Polipose Adenomatosa Familiar. Rastreamento de variante patogênica familiar conhecida Inclui a identificação das mutações recorrentes (hot spot) nos codons 1061 e 1309 de APC. Finalidade: MLPA deve ser realizado em conjunto ou após resultado negativo do sequenciamento nos genes APC e MUTHY em caso índice. Alvo molecular : APC e MUTYH Método: Detecção de variações no número de cópias (CNV- deleções e duplicações) nos genes APC e MUTHY por MLPA (Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification). Extração de DNA seguida de hibridização com sondas complementares aos 18 exons e região promotora do gene APC e 16 exons gene MUTHY , PCR multiplex, e quantificação comparativa dos produtos de PCR por análise de fragmentos em eletroforese capilar ( ABI Sequencer3130XL). |
